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    細(xì)菌亮發(fā)光桿菌檢測(cè)方法解析

    點(diǎn)擊次數(shù):836次  更新時(shí)間:2017-08-16

    亮發(fā)光桿菌是一類專性寄生于細(xì)菌和放線菌等微生物的病毒,其個(gè)體形態(tài)極其微小,用常規(guī)微生物計(jì)數(shù)法無法測(cè)得其數(shù)量。當(dāng)烈性噬菌體侵染細(xì)菌后會(huì)迅速引起敏感細(xì)菌裂解,釋放出大量子代噬菌體,然后它們?cè)贁U(kuò)散和侵染周圍細(xì)胞,zui終使含有敏感菌的懸液由混濁逐漸變清,或在含有敏感細(xì)菌的平板上出現(xiàn)肉眼可見的空斑──噬菌斑。了解噬菌體的特性,快速檢查、分離,并進(jìn)行效價(jià)測(cè)定,對(duì)在和科研工作中防止噬菌體的污染具有重要作用。

    檢樣可以是發(fā)酵液、空氣、污水、土壤等(至于無法采樣而需檢查的對(duì)象,可以用無菌水浸濕的棉花涂拭表面作為檢查樣品)。為了易于分離可先經(jīng)增殖培養(yǎng),使樣品中的噬菌體數(shù)量增加。

    采用微生物測(cè)定法進(jìn)行噬菌體檢測(cè),約需12h左右,因而不能及時(shí)判斷是否有噬菌體污染。通過快速檢測(cè)可大致確定是否有噬菌體污染,以采取必要的防治措施。根 據(jù)正常發(fā)酵(培養(yǎng))液離心后菌體沉淀,上清液蛋白含量很少,加熱后仍然清亮;而侵染有噬菌體的發(fā)酵(培養(yǎng))液經(jīng)離心后其上清液中因含有自裂解菌中逸出的活性蛋白,加熱后發(fā)生蛋白質(zhì)變性,因而在光線照射下出現(xiàn)丁達(dá)爾效應(yīng)而不清亮。此法簡(jiǎn)單、快速,對(duì)發(fā)酵液污染噬菌體的判斷亦較準(zhǔn)確。但不適于溶源性細(xì)菌及溫合噬菌體的診斷,對(duì)侵染噬菌體較少的一級(jí)種子培養(yǎng)液也往往不適用。

    噬菌體的效價(jià)即1mL樣品中所含侵染性亮發(fā)光桿菌的粒子數(shù)。效價(jià)的測(cè)定一般采用雙層瓊脂平板法。由于在含有特異宿主細(xì)菌的瓊脂平板上,一般一個(gè)噬菌體產(chǎn)生一個(gè) 噬菌斑,故可根據(jù)一定體積的噬菌體培養(yǎng)液所出現(xiàn)的噬菌斑數(shù),計(jì)算出噬菌體的效價(jià)。此法所形成的噬菌斑的形態(tài)、大小較一致,且清晰度高,故計(jì)數(shù)比較準(zhǔn)確,因而被廣泛應(yīng)用。
     SFMC     人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物     規(guī)格:    48T/96T
     sVCAM-1     人可溶性血管細(xì)胞粘附分子1     規(guī)格:    48T/96T
     sEPCR     人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體     規(guī)格:    48T/96T
     VEGFR-2/sFLK-1     人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2     規(guī)格:    48T/96T
     sAC     人可溶性腺苷酸環(huán)化酶     規(guī)格:    48T/96T
     sCKR     人可溶性細(xì)胞因子受體     規(guī)格:    48T/96T
     sICAM-1     人可溶性細(xì)胞間粘附分子1     規(guī)格:    48T/96T
    亮發(fā)光桿菌

     

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